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    Title: 核醣核酸還原酶與甲型前胸素原在皮膚癌化過程中所扮演的角色
    Other Titles: Biological Roles of Ribonucleotide Reductase M2 and Prothymosin Alpha during Skin Carcinogenesis
    Authors: 陳曜鴻
    Contributors: 淡江大學化學學系
    Keywords: 斑馬魚;皮膚癌;核糖核酸還原酶;zebrafish;skin cancer;ribonucleotide reductase
    Date: 2011-08
    Issue Date: 2015-06-02 15:12:57 (UTC+8)
    Abstract: 本計畫是以分子生物與發育生物學的角度,探討皮膚癌化的機制與核苷酸還原酶 (ribonucleotide reductase M2, rrm2)、基因胸腺素原(prothymosin alpha, ptma)的基因、 Gli 轉錄因子、Shh 訊息傳遞途徑之關係。Shh 訊息傳遞途徑在人類與老鼠的基底細胞癌 中均有過度表現的現象。本實驗室先前發表之研究結果顯示,當過度表現Shh 訊息傳遞 途徑時,rrm2 及ptma 的基因表現均有顯著增加的趨勢。rrm2 與ptma 在正常生理功能 與病理癌化過程中皆扮演相當重要的角色,然而其參與皮膚癌化的分子機制至今仍然所 知有限。本研究欲利用斑馬魚胚胎及人類皮膚細胞探討皮膚癌化之分子機制,其研究結 果在學術上及應用上,都有助於了解皮膚癌化以及抗癌藥物治療皮膚癌的分子機制。這 些研究項目十分繁重,擬分三年來完成下列目標。 第一年計畫的目標在於建立 keratin18:rrm2:RFP 與keratin18:ptma:RFP 基因轉殖魚品 系,再利用分子生物方法驗證這些魚是否罹患皮膚癌。內容涵蓋:(1) 構築rrm2 或ptma 致癌蛋白分別與紅螢光蛋白(RFP)報導基因融合的表現質體;(2) 顯微注射法將上述 質體植入斑馬魚胚胎內;(3) 穩定遺傳品系的獲得;(4) 切片技術與組織染色;(5) 轉殖 品系的量產。 第二年計畫的目標在於選殖出 rrm2 與ptma 這兩個基因的上游調控區,並找出哪些 功能區可能是轉錄因子Gli 的結合位置。內容涵蓋:(1) keratin18:rrm2:RFP 與 keratin18:ptma:RFP 基因轉殖魚的飼育;(2) 切片技術與組織染色;(3) 抗體免疫螢光染 色實驗的建立;(4) 染色質免疫共同沉澱的操作;(5) 基因上游調控區的選殖。 第三年計畫的目標在於利用細胞轉染方式來直接證明 Shh、Gli 如何調控rrm2 與 ptma 而引起皮膚癌,甚至引發其他的癌症。內容涵蓋:(1) 細胞培養;(2) 切片技術與 組織染色;(3) 抗體免疫螢光染色實驗的建立;(4) 染色質免疫共同沉澱的操作;(5) 細胞轉染;(6) 冷光分析儀之操作;(7) 定點突變技術的操作。
    Appears in Collections:[Graduate Institute & Department of Chemistry] Research Paper

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